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2023-06-169554 次瀏覽
免疫檢測,你只知道ELISA?帶你認識DELFIA技術!


你只知道ELISA?


在生命科學領域多種情況下,及時、高效、經濟地測定和量化樣品中存在的抗原或抗體是至關重要的環節。

酶聯免疫吸附實驗(ELISA)已被證明是非常寶貴的研究和診斷工具, 通過將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶(主要是HRP)標記的抗原抗體反應在固相表面,從而測量生物樣品中的抗體或抗原。


ELISA原理示意圖

傳統ELISA避免了同位素的使用,消除了安全性的隱患,但外部條件對溶液顏色變化的影響巨大且OD值有效的線性范圍過低,ELISA檢測的靈敏度和動態范圍大大受制于光吸收技術的缺陷。




高靈敏度熒光ELISA——熒光時代



1982年Halonen等人在J Clin Microbiol雜志上發表了題為” Time-resolved fluoroimmunoassay: a new test for rubella antibodies” 的文章,標志著免疫檢測正式跨入熒光時代,這也是DELFIA技術的原型。

簡單來說,DELFIA相比傳統ELISA實驗有兩個區別:

1. 檢測抗體上的酶HRP換成鑭系螯合物((Eu, Sm, Tb, Dy)標記。

2. 檢測方式為熒光檢測。


DELFIA原理示意圖

DELFIA中用到的鑭系元素是一類特殊的具有熒光性質的元素,這對實驗材料——酶標板提出了要求。

絕大多數ELISA都選擇透明酶標板作為作為載體和容器,但發光反應中發射出的光是各向同性的,光不僅會從垂直方向發散,還從水平方向發散出來,很容易的就會通過透明酶標板各個孔之間的間隙和孔壁。相鄰孔之間相互影響,造成結果失誤。



黑白兩色酶標板更適用于發光檢測




白色的酶標板可用于較弱的光檢測,常用于一般的化學發光和底物顯色(如雙熒光素酶報告基因分析)。

黑色的酶標板因其自身會有光吸收,其信號要弱于白色的酶標板,一般用于檢測較強的光,如熒光檢測。



產品詳情

可拆式,高結合力,黑色條,袋裝


產品優勢

? 高結合力

耐思黑色酶標板由非自熒光材料制成,表面經處理后,其蛋白結合能力大大增強,可達500ng IgG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。


? 背景熒光低,可消除非特異反應帶來的問題。

黑色的酶標板因其自身會有光吸收,可排除一些較弱的背景干擾熒光。


? 可拆式設計

白色酶標板框搭配黑色酶標板條的可拆式設計更便于操作。


拆裝動作


當需要將板條拆下時,可從板條正面兩端輕輕向上掰動,然后摳取下來,如上圖所示。

若板條太緊難以掰動,可用手指抵住板條底部輕輕向上頂,然后如上圖將板條摳取下來。

務必要戴好無塵手套,以免污染板條而影響板條的透光性。


不可從板條的一端強行掰取,容易造成板條斷裂。


在裝板條時,要注意方向,板條兩端分別設計成方形和半圓形,半圓形那端必須裝在有凸起臺階的卡槽內(箭頭所在處),切勿裝反。


將板條裝入板框后,在兩側和中間部位都需要進行按壓,壓實后方可進行后續實驗。




ELISA·DELFIA



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